体内药理药效评价服务

体内药理药效评价服务---糖尿病/肥胖

糖尿病是一种全球流行的慢性进展且不可治愈的疾病，90%的糖尿病患者为II型糖尿病。当前的降糖治疗有显著的副作用，因此急需风险更低的新治疗药物并控制糖尿病并发症。同时，急需能够加强新药用于患者之前的临床前评价的合适的技术和模型。

糖尿病/肥胖模型

DIO models

DIO+STZ induced T2DM models

BKS-DB自发性糖尿病小鼠

ZDF自发性糖尿病大鼠

B6-OB自发性肥胖/糖尿病小鼠

检测项目

摄食量，血糖，GTT，ITT，心超，体脂比，骨密度，代谢笼，血生化，胰岛素检测，糖化血红蛋白，代谢相关的细胞因子，炎症因子，组织病理学

糖尿病/肥胖模型鼠特征对比

体内药理药效评价服务---DIO小鼠

锐赛生物心血管与代谢疾病部门利用C57BL/6JNju小鼠从5周开始喂养自制高脂饲料（XZ-HF-60)或者60%高脂饲料（D12492）进行造模，此品系可以用研究糖尿病、炎症、代谢类疾病等。目前我们可以提供6-29周龄的DIO小鼠。

DIO 小鼠模型特点

• 可以用7-30周的DIO雄鼠研究饮食诱导性肥胖

• 可用于体内药理学研究

• 可用于表型和母性研究

  
  

体重/体脂监测

GTT/ITT分析

体内药理药效评价服务---DIO+STZ诱导的T2DM模型

C57BL/6 模型造模方法：

6周龄，60% HF 饲料饲养4周，禁食过夜后腹腔注射STZ（25mg/kg）3次，每次间隔1天

SD Rat 模型造模方法：

6周龄，60% HF 饲料饲养2个月，禁食过夜后腹腔注射STZ（45mg/kg）1次

体内药理药效评价服务--- 自发糖尿病小鼠/大鼠

BKS-DB

模型描述：

BKS-DB模型以Dock7^m小鼠为背景，利用CRISPR/Cas9技术和囊胚注射技术构建Dock7^m-Lepr双基因突变小鼠。该品系纯合子血糖监测发现，血糖水平与野生对照相比呈显著性差异，可用于II型糖尿病研究。

模型数据：

B6-OB

模型描述：

B6-OB模型是利用针对mouse Leptin基因的gRNA, 采用CRISPR/Cas9技术和囊胚注射技术，得到能够导致Leptin基因移码突变的小鼠模型。纯合子小鼠大约4周开始出现肥胖表型，可达野生型小鼠体重的3倍，可用于肥胖症研究。纯合子小鼠血糖在12周以前略高于对照组，之后恢复正常，是早期高血糖模型。

模型数据：

体内药理药效评价服务---心血管疾病

心血管疾病模型

• 自发高血压小鼠模型

• 自发性动脉粥样硬化小鼠模型

• 冠状动脉结扎致心肌缺血大鼠模型

检测项目

血压，血清TC，TG，HDL-c，LDL-c，血管组织病变，Cholesterol Efflux Assay，炎症因子，心率，心超，心脏组织病变

B6.129P2-Nos3^tm1Unc/J自发高血压小鼠模型

模型描述：

B6.129P2-Nos3^tm1Unc/J模型以C57BL/6J小鼠为背景，利用传统ES打靶技术构建Nos 3基因突变小鼠。该品系纯合子血压监测发现，血压水平较野生对照高约20 mmHg，同时也表现出心率下降。

模型数据：

B6/JNju-Apoe^em1Cd82/Nju动脉粥样硬化小鼠模型

模型描述：

该模型是以C57BL/6J小鼠为背景的ApoE基因敲除鼠，采用CRISPR/Cas9方法制作，Exon 3上切割产生的断口经NHEJ修复后，引入的in-del突变导致基因失活。ApoE敲除小鼠喂食40%高脂饲料后，能加快动脉粥样硬化的进程。

模型数据：

小鼠主动脉弓油红O染色实验结果

B6/JNju-Ldlr^em1Cd82/Nju动脉粥样硬化小鼠模型

模型描述：

该模型是利用针对mouse LdlR基因的gRNA, 采用CRISPR/Cas9技术和囊胚注射技术，得到能够导致LdlR基因移码突变的小鼠模型。LdlR基因缺陷小鼠可用来研究糖尿病肾病，动脉粥样硬化高脂血症和高血糖疾病等。

模型数据：

冠状动脉结扎致心肌缺血大鼠模型

动物：6周龄SD大鼠（180-220g）

造模方法：大鼠用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，记录Ⅱ导联心电图，呼吸机辅助呼吸(呼吸频率60次／min，潮气量10～12ml，呼吸比为2：1，以保持动脉血PaCO2、PaO2和pH维持在正常范围)。在胸左侧第3、4肋间处打开胸腔，暴露心脏，用细小弯针在冠状动脉左前降支下穿一丝线结扎，以缝线下方心肌色泽变浅、苍白，同时心电图出现ST段弓背向上明显抬高，为结扎成功。

指标观察：造模后24小时，将各组大鼠麻醉取血，分离血清，用自动生化分析仪和化学发光分析机分别测定各组大鼠血中CK-MB、eTNI含量。

结果判定：模型组大鼠血中CK-MB、eTNI含量显著高于假手术组。

内药理药效评价服务---肾病

慢性肾病发病率急剧上升，由于肾病的病因既包括代谢的紊乱也包括免疫系统的下降，另外还受到遗传等因素的影响。因此肾病药物与治疗措施的研发亟需开发多种不同类型的，贴近实际临床病理特征的肾病动物模型。锐赛生物针对肾病药物研发建立了多种肾病模型，为肾病的新药临床前研究提供专业服务。

肾病模型

• 肾纤维化模型

• 单侧肾切除糖尿病模型

• 嘌呤霉素诱导的肾病模型

• 血管紧张素II渗透泵和单侧肾切除诱导的急性肾损伤模型

检测项目

尿量，尿糖，尿蛋白，肾小球滤过率

炎症因子：TGF-β1，IL6 等

肾功能指标：CRE, BUN, UA, Kim-1, renin

肾组织病理检测

肾间质纤维化小鼠模型

模型描述：

利用单侧输尿管梗阻技术，将C57BL/6J小鼠左侧输尿管结扎，结扎后1周内左侧肾脏开始出现肾间质纤维化病理特征，并伴随大量细胞和分子病理生理变化。

模型数据：

体内药理药效评价服务---肾病

模型描述：

利用C57BL/6J小鼠行左侧肾脏切除术，术后正常饲养，护理恢复。1周后给予60%高脂饲料饲养8周，构建单侧肾切除糖尿病小鼠模型。该模型的肾脏病变特征近似糖尿病性肾病，可用于转化医学研究或新药临床前药效评估。

模型数据：

嘌呤霉素诱导的肾病模型(PAN)

模型描述：

利用wistar大鼠行静脉注射嘌呤霉素一次，剂量40mg/kg，构建嘌呤霉素诱导的肾病模型(PAN)。

模型数据：

体内药理药效评价服务---肝病

急性和慢性的肝脏类疾病研究威胁人类的健康，肝脏疾病是药物开发的重点方向。锐赛生物肝病研究团队建立了多种动物及各个种类的肝脏疾病模型，其中包括急性肝损伤模型，肥胖诱发的肝损伤模型，非酒精性脂肪性肝炎（NASH），酒精性脂肪肝（ASH），肝纤维化模型，能够为客户提供高效的先导化合物肝脏疾病疗效筛选验证。

肝病模型

• 高脂诱导的慢性脂肪肝模型

• CCl4诱导的急性肝损伤模型

• 酒精诱导的急性肝损伤

• 胆管结扎引起的肝纤维化模型

• DIO+CCl4诱导的小鼠NASH模型

检测项目

常规：体重，行为，摄食，摄水及排泄

肝脏重量，腹水检查，门静脉测压

生化：血清ALT/AST分析，基因表达及分析，

肝细胞羟脯氨酸检测

病理：肝脏组织H&E染色，IHC，Oil red和Masson Trchrome染色

高脂诱导的慢性脂肪肝模型

模型描述：

利用C57BL/6J小鼠从4周龄开始喂养自制高脂饲料（XZ-HF-60)或者60%高脂饲料（D12492）进行造模，20周龄后模型鼠平均体重＞45g，出现明显的脂肪肝病理改变。

模型数据：

体内药理药效评价服务---肝病

CCl4诱导的急性肝损伤模型

模型描述：

选用6周龄SD大鼠，用四氯化碳（CCl4）诱导法。大鼠按3ml/kg体重腹腔注射50%的四氯化碳橄榄油溶液，24小时后取血检测。

模型数据：

单管结扎引起的肝纤维化模型

模型描述：

选用6周龄SD大鼠，按10mg/kg体重腹腔注射3％戊巴比妥钠麻醉，腹部皮肤消毒，无菌操作沿腹部正中线剪开腹腔，分离出胆管，在胆管近端和远端2处结扎胆管。手术后正常饲养28天。28天后解剖取肝脏进行组织病理学检查。

模型数据：

肝脏组织H&E染色

DIO+CCl4诱导的小鼠NASH模型

模型描述：

选用6周龄SD大鼠，给予60%高脂饲料饲养8周。从高脂饲养第5周开始，每周腹腔注射40% CCl4一次，剂量4ml/kg/次， CCl4 诱导共4周，诱导结束后眼眶采血评估血清生化指标判断造模成功。

模型数据：